2025药典人工牛黄专用分析柱

应用实例--分析14种胆酸类化合物

XAqua C18 牛黄专用柱 4.6x250mm，5um 100A

色谱条件与参数

色谱柱： XAqua C18牛黄专用柱﹐4.6×250 mm﹐5um

流动相：A：0.2％三氟乙酸，B：乙腈

柱 温：30℃

梯 度：

【含量测定】 胆酸类  照高效液相色谱法（通则 0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（ACCHROM XaquaC18 柱，柱长为 25cm，柱内径为 4.6mm，粒径为 5µm）；以乙腈为流动相 A，以 0.2%三氟乙酸溶液为流动相 B，按下表中的规定进行梯度洗脱；用蒸发光散射检测器检测。取牛磺胆酸对照品、牛磺猪去氧胆酸对照品、鹅去氧胆酸对照品及去氧胆酸对照品适量，加甲醇制成每1ml 各含 0.2mg 的溶液，吸取 5µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。理论板数按牛磺胆酸峰计算应不低于 10000；牛磺胆酸与牛磺猪去氧胆酸的分离度应大于 2.0，鹅去氧胆酸与去氧胆酸的分离度应大于 1.5。

对照品溶液的制备 取牛磺胆酸对照品、牛磺去氧胆酸对照品、甘氨胆酸对照品、甘氨去氧胆酸对照品、胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含牛磺胆酸 0.4mg、牛磺去氧胆酸 0.2mg、甘氨胆酸 0.4mg、甘氨去氧胆酸 0.2mg、胆酸 0.5mg、猪去氧胆酸 1mg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品约 0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 15ml，称重，超声处理（功率 500W，频率 53kHz）30 分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液 3µl、5µl、10µl，供试品溶液 5~10µl，注入液相色谱仪，测定，用外标对数方程分别计算含量，即得。

本品按干燥品计算，含牛磺胆酸（C26H45NO7S）应为 2.0%~8.0%；含甘氨胆酸（C26H43NO6）不得少于 2.5%；含牛磺胆酸（C26H45NO7S）、牛磺去氧胆酸（C26H45NO6S）、甘氨胆酸（C26H43NO6）及甘氨去氧胆酸（C26H43NO5）的总量不得少于 9.0%；含猪去氧胆酸（C24H40O4）不得少于 9.0%；含胆酸（C24H40O5）应为 4.5%~7.5%。